Lumineszenzmikroskopie: Studienmerkmale

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Lumineszenzmikroskopie: Studienmerkmale
Lumineszenzmikroskopie: Studienmerkmale
Anonim

Der Begriff "Mikroskopie" hat griechische Wurzeln. Übersetzt bedeutet es das Studium von Objekten mit hochpräzisen Instrumenten. In letzter Zeit werden Fluoreszenz- und Elektronenmikroskopie immer beliebter.

Fluoreszenzmikroskopie
Fluoreszenzmikroskopie

Auflösung

Darunter verstehen sie in der Regel den Mindestabstand, bei dem klar unterscheidbare Objekte geortet werden können. Der Grad des Eindringens in die mikroskopische Welt und die Fähigkeit, die Größe des untersuchten Elements zu berücksichtigen, hängt von der Auflösung der Ausrüstung ab. Bei starker Vergrößerung können die Grenzen von Objekten verschmelzen. Dementsprechend gibt es gewisse Grenzen, jenseits derer die Approximation von Elementen bedeutungslos ist.

Methode der Lumineszenzmikroskopie: Mechanismus

Wenn die von einer Substanz absorbierte Energie in sichtbare Strahlung umgewandelt wird, entsteht ein Leuchten. Es wird Lumineszenz genannt. Dieses Phänomen ist darauf zurückzuführen, dass einige Substanzen unter dem Einfluss von Licht beginnen, Strahlen mit einer anderen (normalerweise großen) Wellenlänge zu emittieren. Darüber hinaus haben einige Objekte, die bei normaler Beleuchtung eine gewisseFarbe, unter dem Einfluss von Ultraviolett ihre Farbe ändern.

Methode der Fluoreszenzmikroskopie
Methode der Fluoreszenzmikroskopie

Besonderheiten

Ein Gegenstand, der unter ultraviolettem Licht nicht zu sehen ist, kann einen hellen Glanz abgeben, wenn er mit einer speziellen Substanz behandelt wird. Darin leuchten die Elemente im Dunkeln in verschiedenen Farben. Die Stärke der Strahlung ist unterschiedlich, aber in der Regel gering. In diesem Zusammenhang ist die Fluoreszenzmikroskopie in einem abgedunkelten Raum effektiv. Bei dieser Art der Untersuchung wird das Objekt in dem Licht betrachtet, das es selbst aussendet. Die chemische Zusammensetzung von Geweben und Zellen beeinflusst die Qualität der Studie. Die Fluoreszenzmikroskopie wird gewissermaßen als histochemische Untersuchung betrachtet.

Klassifizierung

Fluoreszenzmikroskopie kann primär oder sekundär sein. Im letzteren Fall wird das Objekt mit speziellen Verbindungen bearbeitet, die einen Glanz verleihen. Die primäre Fluoreszenzmikroskopie basiert auf der eigenen Fähigkeit des Elements, Licht zu emittieren.

Fluoreszenz- und Elektronenmikroskopie
Fluoreszenz- und Elektronenmikroskopie

Ausrüstung

Fluoreszenzmikroskopie wird mit einer Vielzahl von Geräten durchgeführt. Ihr Hauptelement ist der Illuminator. Es ist mit einer UV-Lampe ausgestattet. Darüber hinaus verwenden die Geräte eine Reihe von Filtern. Bei einigen Geräten gibt es ziemlich viele verschiedene Konfigurationen. Je nachdem, welche Farbe zur Anregung der Lumineszenz verwendet wird – Ultraviolett oder Blau –, wird ein geeigneter Filter zwischen Lichtquelle und Untersuchungsobjekt platziert. Da das Leuchten eines mikroskopischen Elements energetisch schwächer ist als das anregende Licht, wird es nur unter einer Bedingung eingefangen. Überschüssige Strahlen von der Quelle müssen durch einen Gelb-Grün-Filter abgeschnitten werden. Es befindet sich am Okular des Geräts. Der ausgeprägteste Effekt der Lumineszenz tritt auf, wenn der Filter die von der Lichtquelle ausgehenden Strahlen vollständig abschneidet.

Woraus besteht eine sichtbare Lichtinstallation? Es enthält eine helle Lichtquelle und ein biologisches Mikroskop. Zwischen dem Spiegel des Geräts und der Lampe befindet sich ein Blau-Violett-Filter. Es kann FS-1, UFS-3 und so weiter sein. Der Gelbfilter wird auf das Okular des Mikroskops aufgesetzt. Mit ihrer Hilfe fällt blau-violettes Licht auf das Objekt. Es regt Lumineszenz an. Aber dieses Licht kann das Sehen des Glühens stören. Daher wird es auf dem Weg zum Auge durch einen Gelbfilter abgeschnitten. Die Beleuchtung erfolgt bis auf eine Ausnahme nach Köhler. Die Kondensormembran muss vollständig geöffnet sein. Bei der Untersuchung ist es wichtig, ein nicht fluoreszierendes Immersionsöl zu verwenden. Um das eigene Leuchten zu reduzieren, wird ihm Nitrobenzol zugesetzt (2-10 Tropfen / 1 g).

Anwendung in der Fluoreszenzmikroskopie
Anwendung in der Fluoreszenzmikroskopie

Lumineszenzmikroskopie: Anwendungen in der Mikrobiologie

Die Vorteile dieser Art von Studie sind:

  1. Funktion zur Farbdarstellung.
  2. Selbstemittierende Elemente mit hohem Kontrast auf schwarzem Hintergrund.
  3. Erkennung und Lokalisierung bestimmter Arten von Viren und Mikroben.
  4. Die Fähigkeit, transparent und undurchsichtig zu studierenlebende Organismen.
  5. Studium der Lebensvorgänge in ihrer Dynamik.

Es sollte auch gesagt werden, dass die Lumineszenzmikroskopie zur Entwicklung der besten Methoden der Histo- und Zytochemie, der Express-Diagnostik, beiträgt.