Dieser Artikel widmet sich dem Phänomen der Fällungsreaktion. Hier werden wir die Merkmale der Formulierung dieses Phänomens, das Phänomen der Verbreitung, allgemeine Merkmale, die Rolle im menschlichen Leben und vieles mehr betrachten.
Einführung in das Phänomen
Präzipitation ist ein serologisches Phänomen, bei dem lösliche Antigene mit Antikörpern interagieren und als Ergebnis eine Präzipitation beobachtet wird - ein Präzipitat.
Das allgemeine Merkmal der Präzipitationsreaktion ist eine Form von koordinierter Einfluss von Antigen und Antikörper. Derartige Wechselwirkungen ermöglichen es, durch Zugabe bekannter Antikörper und Antigene das Vorhandensein unbekannter Antigene in der Testsubstanz nachzuweisen. Der Fällungsprozess ohne Anwesenheit von Salzen verläuft schlechter, und das beste Optimum liegt im Bereich von 7,0-7,4 pH.
Bestandteile einer Reaktion
Unter den Komponenten der Fällungsreaktion gibt es drei Hauptelemente:
- Ein Antigen mit molekularer Natur. Es befindet sich im Feinschriftzustand, mit anderen Worten, eslöslich. Ein solches Antigen wird auch Präzipitogen genannt, das ein Lysat oder Gewebeextrakt usw. ist. Ein Präzipitogen hat einen charakteristischen Unterschied zu einem Agglutinogen, der in der Größe der Teilchen liegt, aus denen es besteht. Agglutinogen hat eine inhärente Zellgröße und Präzipitogene entsprechen der Größe des Moleküls. Die Antigenlösung zeichnet sich durch Transparenz aus.
- Ein Antikörper, der im menschlichen Blutserum sowie im immundiagnostischen Serum gefunden wird, das die untersuchten Antikörper enthält.
- Elektrolyte sind Natriumchloridlösungen, die isotonisch sind.
Präzipitogen-Produktion
Der Aufbau einer Präzipitationsreaktion ist ohne ein Präzipitogen unmöglich, das durch Mahlen von Materialien und Extrahieren von Proteinantigenen daraus gewonnen wird. Die Extraktion erfolgt durch Kochen oder andere Methoden.
Lysate sowie Gewebe- und Organextrakte, Blutserum, verschiedene Arten von Filtraten auf der Basis von mikrobiellen Brühenkulturen sowie Salzextrakte von Mikroorganismen und Autolysatsubstanzen sind auffällig Beispiel für Präzipitogene.
Aufstellen im Niederschlag
Betrachten wir nun die Methode zum Aufbau der Fällungsreaktion.
Es wird eine Ringfällungsreaktion durchgeführt, die in speziell präparierten Reagenzgläsern stattfindet. Serum wird in den Hohlraum der Schalen eingeführt und mit Hilfe einer Pipettentülle über die Wand gegossen. Als nächstes wird die entsprechende Menge an Präzipitat vorsichtig darüber geschichtet, und dann wird das Rohr von einer horizontalen in eine vertikale Position gebracht. Die Einstellung und Berücksichtigung der Fällungsreaktion ist eine sehr akribische Operation. Das Ergebnis wird nach Erscheinen eines weißen Rings an der Grenze zwischen Antigen und Antikörper aufgezeichnet. Stimmen die reagierenden Elemente der Reaktion überein, dann binden sie, was sich aber erst nach längerer Zeit ihrer Wechselwirkung bemerkbar macht.
Die Fällungsreaktion wird ebenfalls in einer Petrischale oder auf einem Glas durchgeführt Folie, wo Agar-Gel übertragen wird, in einer kleinen Schicht auftragen. Nachdem es im Gel ausgehärtet ist, wird eine kleine Anzahl von Vertiefungen ausgeschnitten, in die Antigene und Antikörper platziert werden. Es gibt zwei Möglichkeiten, diese Aktion durchzuführen: die Methode der radialen Immundiffusion und die doppelte Immundiffusion.
Allgemeine Informationen
Die Mechanik der Fällungsarbeit ähnelt der des Agglutinationsgeräts. Unter dem Einfluss von Immunserum reduziert das bereits in die Reaktion eingetretene Antigen seinen Dispersitätsgrad. Eine wichtige Bedingung ist die Transparenz sowohl des Serums als auch des Antigens.
Sie können die Registrierung der Reaktion verbessern, wenn Sie Antikörper mit Antigenen überlagern. Als Ergebnis kann das Auftreten von Niederschlägen in Form eines Rings beobachtet werden. Dieses Phänomen wird als Ringfällung bezeichnet und wird in speziellen Rohren mit einem Durchmesser von 2,5 bis 3,5 mm durchgeführt. Eines der häufigsten Beispiele für eine Präzipitationsreaktion ist die Diagnose Milzbrand.
Die Präzipitation ermöglicht die Bestimmung des Toxigenitätsgrades einer Diphtherie-Kultur in Agar.
Während der betrachteten Reaktiones kommt zur Präzipitation von antigenen Komplexen und Antikörpern. Präzipitation ist ein immunologisches Phänomen, mit dem Sie die Menge an Antikörpern im Blutserum von kranken oder geimpften Personen und Tieren bestimmen können.
Titrationskonsequenz
Es ist wichtig zu wissen, dass die durch Titration der obigen Methode erh altenen Daten nicht quantifizierbar sind. Um eine quantitative Aussage über die enth altene Anzahl an Antikörpern zu erstellen und zu analysieren, wurde von M. Heidelberger und E. Kabat eine spezielle Reaktionstechnik entwickelt, die auf der Suche und Identifizierung der Äquivalenzzone basiert. Das Mischen der Alterszahl von Antigenen mit einem konstanten Antiserumvolumen führt zu einer Zunahme des ursprünglich gebildeten Niederschlags und nimmt dann aufgrund einer Zunahme der Fähigkeit zur Auflösung der Antigenkomplexe wieder ab. Indem Sie die Menge an Antikörpern in den in jedem Röhrchen enth altenen Überständen bestimmen, können Sie feststellen, dass einer bestimmten Anzahl von Schalen mit Antikörpern Flüssigkeit fehlt. Hier bildet sich im Vergleich zu anderen Reagenzgläsern der größte Niederschlag. Aufgrund dessen und der Subtraktion des antigenen Proteinpräzipitats vom Gesamtwert der Proteine ist es möglich, den genauen Wert der Antikörper zu erh alten, die in dem Volumen des untersuchten spezifischen Serums enth alten sind. Weiterhin wird die Menge an Proteinmolekülen des Präzipitats durch die Menge an Stickstoff oder mit kolorimetrischen Methoden bestimmt.
Bewertung von Werten
Schätzung von Niederschlagswerten in der diagnostischen Methodik sollte die Möglichkeit des Vorhandenseins eines Antikörpers im Immunserum berücksichtigen, der nicht die Eigenschaft von Präzipitin hat, woraus folgt, dass der Niederschlag selbst möglicherweise nicht vorhanden ist entsteht nach Reaktion mit Antigenen. Die Liste solcher Moleküle umfasst unvollständige Antikörper und einige Spezies aus der Gruppe der Gamma-A-Globuline.
Die Fällungsreaktion unter Laborbedingungen findet ihre Anwendung in verschiedenen Arten von Modifikationen. Beispielsweise wird die Thermopräzipitationsreaktion verwendet, um bakterielle Antigene von Botulismus, Anthrax usw. nachzuweisen, die keiner thermischen Denaturierung unterliegen. Im Gegensatz zur Ringfällung werden bei dieser Art von Reaktion Filtrate des betreffenden Materials in gekochtem Zustand verwendet.
Die Analyse der Fällungsreaktion in einem komplexen Gemisch erlaubt keine Charakterisierung der Eigenschaften einzelner Elemente des Gemisches. In solchen Fällen greift eine Person auf die Präzipitationsmethode in Agar zurück und verwendet auch Immunelektrophorese.
Diffuser Niederschlag
In diesem Forschungsgebiet gibt es das Konzept einer diffusen Präzipitationsreaktion (RPD). Es basiert auf der Fähigkeit, Antikörper und lösliche Antigene im Gel zu diffundieren. Diffusion ist die Fähigkeit eines Moleküls einer bestimmten Substanz, in die Moleküle einer anderen einzudringen, was durch thermische Bewegung verursacht wird.
Gel ist ein dispergiertes System, bei dem die flüssige Phase gleichmäßig in der festen Phase verteilt ist. Am häufigsten wird für eine solche Reaktion Agargel verwendet.
Nach Eingabe der Parameter inBedingungen, unter denen die Moleküle zueinander diffundieren können, wird ihr Zusammentreffen von der Bildung eines Antigen + Antikörper-Komplexes begleitet. Ein solches Neoplasma kann diffundieren, da es sich im Gel selbst befindet, und es fällt aus und nimmt die Form eines Streifens an, der mit bloßem Auge erkannt werden kann. Wenn das Antigen und der Antikörper homolog sind, bildet sich keine Bande.
Um die Bedingungen zu schaffen, unter denen die Diffusion in der Agarschicht stattfindet, müssen die Komponenten eingegossen werden, aber die Gesamtzahl der Vertiefungen und ihre relative Position wird durch bestimmt die Art der erforderlichen Aufgabe entscheiden. RPD gibt einer Person die Möglichkeit, unbekannte isolierte Viren durch Tests mit bekannten Antikörperseren zu erkennen und zu identifizieren.
Bewerbung
Präzipitation ist nicht nur in der Diagnose von Krankheiten weit verbreitet, sondern findet auch in der gerichtsmedizinischen Untersuchung Anwendung. Es ist schwierig, sich eine Analyse vorzustellen, bei der es möglich ist, die Art von Blut, Organteilen oder Gewebe zu bestimmen, die auf einer Tatwaffe gefunden werden, die nicht die Präzipitationsreaktion verwendet. Dabei werden Präzipitationsseren verwendet, die durch Immunisierung verschiedener Tiere und Vögel gewonnen werden. Wichtig ist, dass der Serumtiter nicht unter 1:10000 liegt und auch eine ausreichende Spezifität aufweist. Aus dem festgestellten Blutfleck oder seiner Kruste wird ein Extrakt zur körperlichen Untersuchung hergestellt. Lösung, die weiter ausgesetzt werdenpräzipitierendes Serum. Gemäß dieser Reaktion ist es möglich, die Arten von Geweben und Organproteinen sowohl von Menschen als auch von Tieren festzustellen. Die Gewinnung trüber Extrakte zwingt zur Ausfällung auf Agar.
Schlussfolgerungen
Aus der Analyse der gelesenen Informationen können wir schließen, dass Präzipitationsreaktionen für eine Person äußerst wichtig sind, da sie die Diagnose verschiedener Antigene mithilfe von Antikörpern ermöglichen. Dieses Phänomen wird auch häufig in der forensischen medizinischen Untersuchung verwendet und ermöglicht die Identifizierung der Art von Blut, Gewebe oder Organ in Bezug auf ein bestimmtes Thema. Es gibt verschiedene Arten und Methoden der Ausfällung, die entsprechend den sich abzeichnenden Bedürfnissen des zu lösenden Problems eingesetzt werden.
