Die Vielf alt bakterieller Infektionen erfordert eine eindeutige Identifizierung des Erregers und die Definition seiner Spezies. Um die Art des Mikroorganismus zu bestimmen, werden Mikrobiologen durch seine färbenden Eigenschaften unterstützt - die Anfälligkeit der Mikrobe für die Färbung mit verschiedenen Farbstoffen. Mit dieser Methode können Sie die Morphologie des Erregers untersuchen. Die färbenden Eigenschaften von Bakterien sind von großer Bedeutung für die praktische und theoretische Forschung auf dem Gebiet der Mikrobiologie.
Mikrobiologische Forschung
In der Bakteriologie gibt es viele Methoden zum Anfärben von Mikroorganismen. Sie alle basieren auf den färbenden Eigenschaften von Bakterien. Durch die Färbung können Sie ihre Form, Struktur, Größe und relative Position bestimmen. Damit lassen sich die Probleme der Systematisierung der Mikroorganismenarten der allgemeinen Biologie und der vergleichenden Mikrobiologie lösen.
Warum malen sie
Bakterien sind praktischtransparente Organismen, und ohne die Verwendung von Färbung sind sie für die herkömmliche Mikroskopie schlecht sichtbar. Sie können spezielle Arten der Mikroskopie (Phasenkontrast, Dunkelfeld) verwenden, um Objekte zu untersuchen, aber der einfachste Weg ist die Färbung, wonach die Bakterien in einem herkömmlichen Lichtmikroskop sichtbar werden.
Probenvorbereitung
Unabhängig von der verwendeten Färbetechnik gibt es einheitliche Regeln für die Präparation des Untersuchungsobjekts. Folgende Phasen sind obligatorisch:
- Sterile Instrumente machen einen Abstrich auf einem Objektträger.
- Die Probe wird getrocknet. Dies geschieht bei Raumtemperatur oder im Trockenschrank.
- Gefolgt von der Fixierung - Mikroorganismen werden mit speziellen Verbindungen an das Glas gebunden.
- Korrekte Färbung - die Probe wird für einen festgelegten Zeitraum mit Farbstoff bedeckt, danach wird sie abgewaschen.
- Endtrocknung - die Probe wird erneut getrocknet.
Die gängigsten Farbstoffe
Die am häufigsten verwendeten Farbstoffe basieren auf Anilin mit unterschiedlichen Säurewerten (pH). Die meisten Farbstoffe sind in Alkohol verdünnte Pulver.
Farbstoffe, in denen Kationen die Farbstoffe sind, werden basisch genannt (pH größer als 7). Sie können verwendet werden, um Mikroorganismen in den Farben Rot (Magenta, Safranin), Violett (Methylviolett, Thionin), Blau (Methylenblau), Grün (Malachitgrün), Braun (Chrysoidin) und Schwarz (Indulin) anzufärben.
Farbstoffe, bei denen die Farbstoffe Anionen sind, nennt man sauer (pH kleiner 7). Sie färben die Probe rot (Eosin), gelb (Pikrin) oder schwarz (Nigrosin).
Es gibt eine Gruppe neutraler Farbstoffe (z. B. Rhodamin B), bei denen sowohl Kationen als auch Anionen als Farbstoffe wirken.
Kultur tot oder lebendig
Färbemethoden werden je nach Lebensform des Prüflings in zwei Gruppen eingeteilt.
- Vitalfärbung (lebenslang). Diese Methode zur Untersuchung der Eigenschaften von Mikroorganismen wird bei der Untersuchung lebender Gewebe verwendet, wodurch die lebenswichtigen Prozesse von Mikroben beobachtet werden können. Für diese Färbung werden Farbstoffe mit geringer Toxizität und hoher Durchdringungskraft verwendet.
- Postvitalfärbung. Dies ist das Anfärben von toten oder abgetöteten Mikroorganismen. Dank der färbenden Eigenschaften von Bakterien bestimmen Mikrobiologen ihre Struktur. Diese Färbung wird am häufigsten verwendet.
Gram-positiv und Gram-negativ
Es sind diese Eigenschaften von Bakterien, die in den Gebrauchsanweisungen verschiedener Medikamente zu finden sind. Diese Methode zur Untersuchung der färbenden Eigenschaften von Bakterien basiert auf der Verwendung von Enzianviolett-Farbstoff und Jodfixierung. Dies ist die Technik von Hans Christian Gram, einem dänischen Arzt, der sie 1884 vorschlug. Als Ergebnis dieser Färbung werden Bakterien in zwei Gruppen eingeteilt:
- Gramm (+) - wird blau(Staphylokokken und Streptokokken).
- Gramm (-) - Fleck rosa bis rot (Enterobakterien, Salmonellen, E. coli).
Unterschiedliche Färbeergebnisse sind auf unterschiedliche Färbeeigenschaften der Bakterienwände zurückzuführen. Die Gram-Färbungsmethode ist nach wie vor die wichtigste bei der Diagnose einiger Infektionskrankheiten.
Andere Färbetechniken
Lassen Sie uns einige weitere Methoden charakterisieren, die in der Bakteriologie weit verbreitet sind.
- Ziehl-Nelson-Methode - bestimmt die Säureresistenz von Bakterien. Es identifiziert die Erreger von Tuberkulose und Mykobakteriose.
- Romanovsky-Giemsa-Technik - färbt acidophile (Essigsäure und Milchsäure) Bakterien rot und basophile (Spirochäten und Protozoen) blau.
- Morozov-Technik - färbt Bakterien braun und macht ihre Geißeln sichtbar.
Sporen sind zu sehen
Tsiels Fuchsin-Färbung ermöglicht es Ihnen, Bakteriensporen zu sehen. Sie haben nach dem Färben eine rosa Farbe und sind vor dem Hintergrund blauer Bakterien deutlich sichtbar. Auch diese Methode ist ein Werkzeug der Bakteriologie und von großer praktischer Bedeutung.
