Bei der Immersionsmethode der mikroskopischen Beobachtung wird eine spezielle Flüssigkeit zwischen die Linse des Geräts und das zu untersuchende Objekt eingeführt. Es verstärkt die Helligkeit und erweitert den Umfang der Bildvergrößerung. So lässt sich das Objekt deutlich heranzoomen und seine kleinsten Elemente ohne Gerätewechsel untersuchen. Dementsprechend wird die Flüssigkeit Immersion genannt. Es kann als eine Vielzahl von Kompositionen dienen. Am beliebtesten ist Immersionsöl. Sehen Sie sich die Funktionen genauer an.
Allgemeine Informationen
Das erste Immersionsöl für die Mikroskopie war Zedernholz. Es hatte jedoch einen entscheidenden Nachteil. Im Laufe der Zeit änderten sich seine Eigenschaften und es erlaubte nicht, die gewünschten Ergebnisse zu erzielen. Im Freien begann die Flüssigkeit allmählich zu kondensieren (bis zum Aushärten). Dementsprechend änderte sich auch der Brechungsindex. Im 20. Jahrhundert begann die Herstellung von synthetischem Immersionsöl. Diese Flüssigkeit wies den oben genannten Mangel nicht auf.
Immersionsölstandards
TasteFlüssigkeitsparameter sind in GOST 13739-78 eingestellt. Immersionsöl hat laut Norm:
- Brechungsindex nd=1,515±0,001;
- Transmission im Spektralbereich von 500 bis 700 nm bei einer Schichtdicke von 1 mm - 95 %, von 400 bis 480 nm - 92 %;
Die optimale Temperatur, bei der Immersionsöl verwendet werden kann, liegt bei 20 Grad. Es gibt auch internationale Standards. Nach ISO 8036/1 beträgt der Brechungsindex 1,518 + 0,0005 und die Transmission bei 10 mm Schicht für den Spektralbereich von 500 bis 760 nm 95 % und bei 400 nm 60 %.
Die angegebenen Parameter entsprechen nicht fluoreszierendem Immersionsöl. Die Norm ISO 8036-1/2 definiert die Eigenschaften von Flüssigkeiten für die Lumineszenz. Die Transmission im Spektralbereich von 500 bis 700 nm in einer Schichtdicke von 10 mm beträgt 95 %, von 365 bis 400 nm - 60 %.
Schwierigkeiten bei Parameterabweichungen
Erkennbare Unterschiede in den oben genannten Standards können zu einer Verschlechterung der Leistung eines bestimmten Objektivs führen, wenn eine ungeeignete Flüssigkeit verwendet wird. Ergebnis:
- Kontrast wird durch sphärische Aberration reduziert.
- Das Feld am Forschungsobjekt ist farbig.
- Die Beleuchtung in der Ebene des Untersuchungsobjekts und im Bereich seiner Bildentstehung wird ungleichmäßig.
- Das Bild wird unscharf.
Nuancen
Optische Mikroskope haben eine obere Auflösungsgrenzeetwas mehr als 100 mal. Bei dieser Vergrößerung sollte die Ausleuchtung des Untersuchungsobjekts von hoher Qualität sein. Andernfalls ist das resultierende Bild so dunkel, dass das Objekt nicht zu sehen ist. Tatsache ist, dass die Brechung und Streuung des Lichts zwischen dem Deckglas und dem Objektiv stattfindet. Immersionsöl trägt zu seiner besseren Erfassung bei. Dadurch wird das Bild klarer.
Merkmale der Lichtbrechung
Wie bekommt man ein klares Bild? In verschiedenen Medien erfolgt die Lichtbrechung auf unterschiedliche Weise. Beispielsweise sind die Brechungswinkel von Strahlen in Luft und Glas unterschiedlich. Im ersten Fall beträgt der Indikator 1,0, im zweiten - 1,5. Das ist das Hauptproblem.
Die Verwendung von Öl ermöglicht es Ihnen, den Brechungsindex der Strahlen zu verringern, die durch das zu untersuchende Objekt gehen. Tatsache ist, dass die Flüssigkeit die gleichen Parameter wie das Glas hat. Dadurch entsteht zwischen dem Objektträger und der Linse ein homogenes Medium, und der größte Teil des durch das Objekt hindurchtretenden Lichts tritt in das Instrument ein. Dies führt zu einem klaren Bild.
Technische Punkte
In der Regel sind Immersionsobjektivfassungen mit Öl graviert. Das Element selbst wird verwendet, wenn eine Apertur von 1,0 oder mehr benötigt wird. Solche "Immersions"-Linsen werden zum direkten Eintauchen in eine Flüssigkeit verwendet. Insofern sind sie vollständig dicht. Dies bietet einen hohen Schutz vor Ölschäden an den Linsen.
Klassifizierung
Öle werden in der Praxis verwendetzwei Viskositäten: hoch (Typ B) und niedrig (A). Oft findet man auf der Verpackung Angaben zum Brechungsindex. Sie stellen beispielsweise Immersionsöl (100 ml) her, dessen Brechungsindex 1,515 beträgt. Flüssigkeiten mit niedriger Viskosität werden auf den Luftraum aufgetragen, und mit hoher Viskosität - zusammen mit Kondensatoren.
Nutzungsbedingungen
Um ein klares Bild des untersuchten Objekts zu erh alten, müssen Sie ziemlich einfache Empfehlungen befolgen:
- Finde das zu untersuchende Objekt auf dem Schieberegler in der Mitte des Feldes mit einer kleinen Erhöhung. Dazu wird ein Objektiv mit geringer Vergrößerung verwendet.
- Turm drehen.
- Objektiv 100x in Arbeitsposition einfahren.
- Geben Sie einen Tropfen Öl auf das Objektträgerglas, den zweiten auf die Linse.
- Stellen Sie den Arbeitsabstand mit Feinfokussierung ein, bis das Motiv gut sichtbar ist.
Beim Arbeiten ist Vorsicht geboten. Es ist wichtig, dass keine Luft zwischen Deckglas und Objektiv gelangt.
Immersionsöl "Minimed"
Flüssigkeit wird verwendet, wenn mit achromatischen und apochromatischen Linsen aller Art von Geräten gearbeitet wird, mit Ausnahme von lumineszierenden. Laut Experten, die dieses Immersionsöl verwendet haben, hat es mehrere nützliche Eigenschaften. Die Flüssigkeit verbessert die Sichtbarkeit des Objekts erheblich und minimiert Blendung, Lichtverlust und optische Aberrationen. Die Verwendung von Öl erweitert die Möglichkeiten der Geräte erheblich.
ReinigungAusstattung
Nachdem mit Immersionsöl gearbeitet wurde, muss das Gerät in Ordnung gebracht werden. Die Reinigung sollte erfolgen, bevor die Linse trocknet. Zum Entfernen von Ölrückständen wird sauberes Linsenpapier verwendet. Ein gerolltes Blatt wird verwendet, um alle Glasoberflächen zu reinigen. Das Linsenpapier sollte mit einer Linsenlösung befeuchtet und jegliche Ölreste entfernt werden.
Historischer Hintergrund
Der erste Wissenschaftler, der den Mechanismus des Eintauchens erklärte, war Robert Hooke. 1678 wurde sein Buch Microscopium veröffentlicht, in dem alle Erklärungen gegeben wurden. 1812 wurde die Immersion als Mittel zur Korrektur von Linsenfehlern vorgeschlagen. Der Autor der Idee war David Buster. Um 1840 wurden die ersten Immersionsobjektive hergestellt. Ihr Schöpfer war D. B. Amici. Zunächst verwendeten die Forscher Anisöle als Immersionsflüssigkeit. Der Brechungsindex war nahe dem von Glas.
