Die moderne Medizin verfügt über spezifische diagnostische Methoden, die es ermöglichen, die Ätiologie von Krankheiten beim Menschen anhand der Definition des Erregers, genetisch fremder Substanzen, die die Immunantwort stimulieren, Nukleinsäuren sowie allergischer und immunologischer Veränderungen festzustellen die aufgrund seiner Handlungen entstehen. Heute ist RIA in der Immunologie und Virologie weit verbreitet, dh Radioimmunoassay, deren Ziele, Komponenten, deren Verlauf, deren Abrechnung wir in diesem Artikel betrachten werden. Dieser Assay ist in der Lage, Antigene aufgrund ihrer Wechselwirkung mit Antikörpern nachzuweisen.
Definition
RIA ist ein Verfahren zur Diagnostik biologisch aktiver Substanzen in Flüssigkeiten, das auf der Reaktion von Antigenen mit Antikörpern unter Verwendung von radionuklidmarkierten analogen Substanzen mit speziellen Bindungssystemen beruht. Nach ihrer Interaktiones bildet sich ein Immunkomplex, der abgetrennt und auf seine Radioaktivität untersucht wird. Es ist bekannt, dass Radioimmunoassays unter Verwendung von Standard-Reagenzkits durchgeführt werden.
Jedes Reagenz kann die Konzentration einer bestimmten Substanz bestimmen. Die einer Person entnommene biologische Flüssigkeit wird mit einem Reagenz gemischt, nach der Inkubationszeit werden die freien und gebundenen radioaktiven Substanzen getrennt, dann wird eine Radiometrie durchgeführt und die Ergebnisse berechnet. Ein Isotop von Jod wird verwendet, um Substanzen zu markieren. Es wird markiert und in einer bestimmten Menge hinzugefügt.
Bewerbung
Die Radioimmunanalyse hat eine breite Anwendung in der Medizin und Mikrobiologie. Es wird zur Diagnose von Herz- und Gefäßerkrankungen, Erkrankungen des endokrinen Systems und anderer Körpersysteme eingesetzt. RIAs werden auch häufig verwendet, um die Ursache der Unfruchtbarkeit, die Pathologie der fötalen Entwicklung, zu identifizieren. In der Onkologie wird diese Analyse durchgeführt, um die Marker von Neoplasien zu bestimmen, um die Wirksamkeit der Behandlung überwachen zu können. In der Immunologie wird RIA verwendet, um das Vorhandensein von Immunglobulinen, Enzymen, Proteinen usw. im Blut zu untersuchen. Heute lässt sich mit dieser Analyse die Konzentration verschiedener Hormone bis zu einem Millionstel Gramm nachweisen. Daher ist die Radioimmunblutanalyse in der Kardiologie, Onkologie, Endokrinologie, Gynäkologie und Virologie weit verbreitet.
RIA-Methoden
Es ist üblich, je nach Art zwischen mehreren Analysemethoden zu unterscheidenReaktionen:
- Die nicht-kompetitive Methode ist gekennzeichnet durch solche Reaktionskomponenten wie Standard- und nachweisbare Antigene, Pufferlösung, isotopenmarkierte Antikörper, bestimmte Antikörper, die an das Sorbens binden. Den zu testenden Antikörpern wird ein Antigen zugesetzt. Nach der Inkubation erscheinen Antigen-Antikörper-Komplexe, das Sorbens wird gewaschen, markierte Antikörper werden hinzugefügt, die an das Antigen im Komplex binden. Die Radioaktivität hängt von der Konzentration des getesteten Antigens ab.
- Kompetitiver Radioimmunoassay wird durch Antigenkonkurrenz vorangetrieben. Dabei handelt es sich um Bestandteile der Reaktion wie Kontrolle und bestimmte Antigene, eine Pufferlösung, bestimmte Antikörper, die an das Sorbens binden, sowie ein isotopenmarkiertes Antigen. Die Diagnose beginnt mit der Einführung des zu untersuchenden Antigens. Auf dem Sorbens wird ein Antigen-Antikörper-Komplex gebildet. Dann wird das Sorbens gewaschen und das markierte Antigen injiziert. Dabei bindet es an den Antikörper. Mit Hilfe von Zählern werden die Reaktion und die Menge an Radioaktivität gemessen. Sie ist umgekehrt proportional zur Antigenmenge in der Probe.
- Die indirekte Methode ist die gebräuchlichste. Dabei hat der Radioimmunoassay der Reaktionsbestandteil wie Kontroll- und Testserum, Antigene oder Antikörper, die an das Sorbens gebunden sind, mit Isotopen markierte Antikörper, Pufferlösungen. Diagnostizierte Antikörper oder Antigene reagieren mit Antigenen oder Antikörpern, die an das Sorbens gebunden sind. Dann wird das Inkubat entfernt, markierte Antikörper werden injiziert, die an bindenAntigen-Antikörper-Komplexe.
Analysemethodik
Der Radioimmunoassay wird also mit speziellen Reagenzien durchgeführt. Die Sätze sind Standard, daher sind Fehler oder Verstöße nicht zulässig. Die diagnostischen Ergebnisse sind zuverlässig. Die Analyse wird morgens durchgeführt, dazu wird einer Person venöses Blut entnommen. Im Labor wird Serum vom Blut getrennt, das für die RIA verwendet wird. Dieses Serum wird mit Reagenzien gemischt. Die resultierende Mischung wird bei einer bestimmten Temperatur in einem Thermostat inkubiert.
Freie und gebundene Isotope werden in der resultierenden Mischung getrennt. Danach wird das erh altene Material untersucht und die Ergebnisse berechnet. Der Radioimmunoassay-Mechanismus hat mehrere Optionen. Die oben beschriebene Technik ist ein Flüssigphasen-RIA, da alle Komponenten in einem flüssigen Zustand sind. Es gibt RIA und Festphase, bei denen Antikörper in einen Träger gegeben werden, der sich nicht in Flüssigkeit auflöst.
Diagnoseverfügbarkeit
Der Einsatz dieser diagnostischen Methode in der Medizin wird von Jahr zu Jahr beliebter. In letzter Zeit ist der Radioimmunoassay zu einem diagnostischen Standardverfahren geworden, das von einem Arzt verschrieben werden kann, wenn eine endgültige Diagnose gestellt wird. Lange Zeit wurde diese Art der Analyse nur in Laboren durchgeführt, heute ist sie zu einer gängigen Forschungsmethode geworden. Aber RIA erfordert die Verwendung teurer Ausrüstung (Gammazähler) und Reagenzienkits haben eine kurze Lebensdauer. All dies ist der Hauptnachteil einer solchen Analyse, die ihre bestimmtteuer.
Darüber hinaus hat RIA kürzlich damit begonnen, modernere Forschungsmethoden zu ersetzen, die keine Interaktion mit Isotopen erfordern. Dazu gehören Enzymimmunoassays. Daher ist RIA in vielen Kliniken wünschenswert. Es wird seit langem in Großstädten und Diagnosezentren verwendet, aber in normalen Krankenhäusern in Kleinstädten wird diese Analyse wegen ihrer hohen Kosten praktisch nicht verwendet.
Würde der RIA
Radioimmunoassay hat viele Vorteile. Es ist ziemlich spezifisch und hat eine hohe Empfindlichkeit, die es ermöglicht, das Vorhandensein biologisch aktiver Substanzen in unglaublich kleinen Mengen zu bestimmen. Diese Analyse wird sehr einfach durchgeführt, eine Person muss nur venöses Blut spenden. Die Testergebnisse sind 100 % genau und schon am nächsten Tag verfügbar. RIA kann auch leicht automatisiert werden. Mit dieser Analyse können Sie also Proteine identifizieren, die Abfallprodukte infektiöser Bakterien sind, was auf das Vorhandensein einer Infektion im Körper hinweist.
Diagnostik in der Virologie
Die vielversprechendste RIA ist für die Virologie, da sie es Ihnen ermöglicht, virale Pathogene schnell zu identifizieren. Dies ist darauf zurückzuführen, dass in den letzten Jahren die Inzidenz verschiedener Infektionen zugenommen hat, die sich mit hoher Geschwindigkeit ausbreiten und zu Todesfällen bei Menschen führen. Dies gilt insbesondere für Länder, die kein Hoch habensoziale und wirtschaftliche Entwicklung (die Länder des Fernen Ostens), Radioimmunoassay ist hier einfach unverzichtbar. Auch die Mikrobiologie nutzt diese diagnostische Methode zum Nachweis von Infektionskrankheiten, die durch pathogene Bakterien verursacht werden. Beispielsweise wird RIA weithin verwendet, um Typhus nachzuweisen. In den ersten Tagen der Krankheit, vor dem Termin der Behandlung, ist es notwendig, eine Untersuchung von Kot und Erbrochenem durchzuführen. Die diagnostischen Ergebnisse werden jedoch erst nach langer Zeit erzielt. Hier hilft RIA, die Analyse ermöglicht es Ihnen, den Erreger der Krankheit in kurzer Zeit zu identifizieren. Eine Person spendet Blut, am nächsten Tag liegen die Ergebnisse der Studie vor. Diese Analyse hilft bei der Erstellung einer genauen Diagnose.
Ergebnisse
Der Radioimmunoassay ist derzeit eines der empfindlichsten diagnostischen Verfahren. Es wird verwendet, um alle Substanzen zu analysieren, gegen die Antikörper gewonnen werden können. Dieses Verfahren ermöglicht es, viele Proben in kleinstem Volumen der untersuchten Flüssigkeit zu machen, sowie die Ergebnisse in kürzester Zeit zu erfassen, da es vollautomatisiert werden kann. Diese Analyse wurde in den 1950er Jahren von Solomon Burson entwickelt. Dreißig Jahre später wurde es weit verbreitet. Bis heute gibt es keine hundertprozentige Alternative zur RIA, da die Analyse eine hohe Sensitivität aufweist. RIA wird in verschiedenen Bereichen der Medizin sowie in der Mikrobiologie und Virologie eingesetzt.
Endlich
Der Einsatz der Methode in der Virologie ist heute sehr relevant, wie es gibtdie Fähigkeit, die Ausbreitung von Infektionen zu untersuchen, eine genaue Diagnose zu stellen und eine spezifische Behandlung zu verschreiben. Dieses Problem ist besonders relevant für Länder mit einem niedrigen wirtschaftlichen und sozialen Entwicklungsstand. Diese Analyse ermöglicht es Ihnen auch, die Menge an Hormonen und Enzymen im menschlichen Körper zu erkennen. Um verlässliche Ergebnisse zu erh alten, muss der Forscher lediglich Blut zur Analyse spenden. Die Medizin steht nicht still, zusammen mit dem Radioimmunoassay erscheinen neue Forschungsmethoden, aber RIA ist nach wie vor einer der führenden Anbieter in der medizinischen Diagnostik.
