Selenit-Bouillon ist ein Anreicherungsmedium mit selektiven Eigenschaften zur Isolierung pathogener Bakterien der Gattung Salmonella (lat. Salmonella). Es ist sehr effektiv, wenn es notwendig ist, diesen bestimmten Erreger unter anderen Vertretern der Darmflora nachzuweisen. Das Medium wird sowohl für die klinische Diagnostik als auch für hygienische Zwecke bei Lebensmitteltests verwendet.
Allgemeine Merkmale
Selenit-Brühe wird auf der Basis eines Pulvers hergestellt, das eine homogenisierte Mischung verschiedener Komponenten der Zusammensetzung ist. Die Farbe des Trockenmaterials kann je nach Art des Mediums hellgelb oder cremefarben sein. Das Pulver ist freifließend.
Fertige Selenitbrühe ist ein flüssiges transparentes Medium von hellgelber Farbe. Diese Masse wird in Behälter gegossen, in denen die Aussaat zur weiteren Inkubation erfolgt.
Es gibt drei Hauptarten von Selenitbrühe:
- reines Medium - geeignet für die Isolierung von Salmonellen aus klinischem und sanitärem Material;
- mit Zusatz von Mannit (Zwei-Komponenten-Brühe) - nur für die Arbeit mit klinischem Material konzipiert;
- Cystein-Selenit-Medium - kann verwendet werden, um Salmonellen aus pathologischem Patienten-Biomaterial (Kot, Urin usw.) zu isolieren.
Diese Typen unterscheiden sich geringfügig in Zusammensetzung und Aktionsfunktionen.
Die Hauptaufgabe der Selenitbrühe besteht darin, die Ansammlung von Salmonellen zu fördern und das Wachstum der begleitenden Mikroflora zu hemmen. Dadurch ist es möglich, den Erreger nicht nur im Material nachzuweisen, sondern auch nachträglich auf Agar zu übertragen. Das Medium wurde von Leifler entwickelt, der als Erster die selektive Wirkung von Selenit gegen Salmonellen entdeckte.
Zusammensetzung
Selenitbrühe enthält:
- Kaseinhydrolysat;
- Laktose;
- Natriumphosphat;
- Natriumhydroselenit.
Selenit-Cystein-Medium enthält zusätzlich zu diesen Komponenten L-Cystein und Natriumhydrogenphosphat. Die Zusammensetzung der Mannitbrühe unterscheidet sich darin, dass sie anstelle von Kaseinhydrolysat peptische Verdauung von tierischem Gewebe enthält. In einer solchen Umgebung gibt es keine Laktose, aber Mannit. Letzteres fungiert als fermentierbares Substrat und sorgt für die Puffereigenschaften der Brühe.
Alle Bestandteile des Pulvers mit Ausnahme von Natriumhydroselenit werden bedingt als Teil A bezeichnet, und die selektive Substanz wird als Teil B bezeichnet.
Funktionsprinzip und Eigenschaften der Umgebung
Selenitbrühe dient als Speichermediummit selektivem Handeln. Die selektive Wirkung wird durch die Toxizität von Selenit erreicht, das das Wachstum der meisten Mikroorganismen hemmt. Gleichzeitig sind Bakterien der Gattung Salmonella in der Lage, diese Verbindung wiederherzustellen und damit die toxische Wirkung auf ihre eigenen Zellen zu beseitigen. Als Ergebnis der Reaktion wird jedoch ein Alkali gebildet, das die nachteilige Wirkung von Selenit auf das Wachstum der damit verbundenen Mikroflora verringert, und daher wird es notwendig, den pH-Wert zu stabilisieren. Diese Funktion übernehmen Bakterien, die Laktose unter Bildung von Säure vergären. Die Pufferung des Mediums erfolgt durch Phosphat.
In der Zweikomponenten-Bouillon wird der pH-Wert durch Mannit stabilisiert. Das Cystein-Medium verbessert die selektive Wirkung gegen Salmonellen. Eine solche Brühe ist wirksam zur Kontrolle des infektiösen Hintergrunds bei Patienten in einem nicht akuten Krankheitsstadium oder Rekonvaleszenten.
Die Manifestation der Wachstumsmerkmale von Referenzstämmen im Medium kann 12-24 Stunden nach Beginn der Inkubation beobachtet werden. In diesem Fall bilden Salmonellen farblose Kolonien.
Kochfunktionen
Die Vorbereitung des Mediums erfolgt in zwei Schritten. Zuerst wird eine Lösung mit einer selektiven Komponente in einer Menge von 4 Gramm Natriumselenit pro Liter destilliertem Wasser hergestellt. Fügen Sie dann 19 Gramm des Hauptpulvers (Teil A) hinzu. Die Lösung wird gründlich gemischt und erhitzt, bis die Partikel vollständig aufgelöst sind, wonach sie in sterile Reagenzgläser gegossen wird.
Beim Kochen ist es wichtig zu folgenTemperaturregime, da das Medium gegen Überhitzung instabil ist. Die Sterilisation der Brühe kann nur in einem Wasserbad oder mit einem Dampfstrahl durchgeführt werden. Das Autoklavieren des Mediums ist strengstens untersagt.
